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葉綠體分離實驗

時間：2015年12月22日 信息來源：湘智離心機 字體：大 中 小 【打印此頁】

設備： 離心機，50ml轉(zhuǎn)頭 PP 離心管，超速離心機，轉(zhuǎn)頭，40ml PA管。 溶液配置： A液：0.35M Sorbitol，（山梨醇），50mM Tris桯CL (PH8.0) 5mM EDTA-Na2 B液：0.35M Sorbitol，50mM Tris桯cl (PH8.0) 25mM EDTA桸a2 C液：30％（w/w）蔗糖，50mM Tris-Hcl(PH8.0) 25mM EDTA桸a2 D液：52％（w/w）蔗糖，50mM Tris-Hcl (PH8.0) 25mM EDTA桸a2   分離步驟： 1．菠菜液40g+A液200ml，制成勻漿，過濾 2．離心機2500RPM?5分，4℃，50mlPP管，得到約10克沉淀。 3．沉淀用6.5ml B液稀釋后得到9.5-10ml原液 4． 日立超離R28S轉(zhuǎn)頭（6?0ml），40mlPA管中底部加18ml D液，中層7ml C液，上部加9.5-10ml 原液。   離心：25，000rpm，60分，4℃，加速7減速8 5．離心后，葉綠體分布在離心管中部形成葉綠體深色條帶（寬13-15mm） 6．檢視：可用光學顯微鏡（?50）可觀察到綠葉體顆粒。



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